外泌體研究常見問題解答51.外泌體樣品如何保存？長期保存，置于-80℃。凍存前，離心去除細胞和細胞碎片，再將樣品分裝保存在-80℃。如果條件允許，建議用新鮮樣品進行外泌體的分離和后續實驗。短期保存（1-2天），置于4℃（確保無菌）。2.分離的外泌體如何保存？（1）使用低吸附離心管或凍存管，減少外泌體粘附。（2）對于短期而言，外泌體可以在4°C下儲存長達1周。對于長期儲存，外泌體可以在-20°C或-80°C下儲存。當長期儲存外泌體時，重要的是要考慮它們是否需要多次解凍。如果需要多次應用（因此需要多次解凍）進行分析，我們建議將外泌體懸浮液等分到多個試管中，以便每個試管只經歷一個冷凍/解凍循環。多次凍融循環會對外泌體造成損傷并減少其數量。外泌體研究工具濃縮型試劑配方，同等實驗需求用量更少，降低長期使用成本。檸檬EVs細胞實驗

你真的知道如何正確收集和保存EVs嗎？樣本的收集和保存是導致實驗結果不確定性的一個重要來源。維思克思長期研究以及不斷試錯得出的“EVs樣本收集和保存”經驗，分享給各位外泌體研究者。血液。血液采集優先隔夜空腹。血漿通常是EVs的優先來源，因為在制備血清時凝塊形成期間會釋放額外的EVs。目前，血清的主要應用是研究miRNA。要制備血漿，血液需要抗凝。細胞培養上清分離EVs。污染EVs和可檢測到的非EV組分的主要來源是培養基中的血清。如果細胞不能在無血清培養基中生長，獲取的EVs將不再純凈，后續研究結果也將不準確。建議超速離心從血清中去除EVs或購買不含EV血清（WSC0020）；培養中監測細胞活率，確保大于90%，否則會釋放凋亡小體和細胞碎片等其他囊泡，影響實驗。WSR0020-3采用獨特配方，可減少EVs的損耗；在動物實驗中，無蛋白配方可明顯降低毒性反應。凍存保護劑選型若需要進行凍干處理，選擇WSR0020-3（凍干兼容）；若用于動物注射實驗，選擇WSR0020-3（無蛋白配方，低內）；若-80℃短期保存，選擇WSR0020（經典款，性價比推薦）。地黃細胞外囊泡工程化外泌體研究工具標準化套裝，涵蓋提取到檢測全流程，提升實驗效率。

相信大家一直都被一個問題困擾，什么樣的外泌體才是好的外泌體呢？采購外泌體時，如何判斷外泌體質量？現在，我們對外泌體供應商-維思克思的外泌體WSR0014-1進行測評。咱們來看看高質量的外泌體到底長什么樣？一、首先對外泌體進行鑒定。首先要證明是外泌體，那如何證明呢？一般從三大基礎表征維度進行分析：形態、粒徑分布、外泌體標志蛋白。二、確定外泌體顆粒數與純度。還需另一重要表征維度外泌體的純度。在做實驗時，怎樣考察純度呢？不同來源的外泌體，因獲取樣本的不一致，每種樣本中雜蛋白的含量不盡相同，同時分離方法也不一定相同，這可能導致不一致的實驗結果。外泌體純度表征可以用顆粒數/蛋白、顆粒數/RNA、蛋白/脂質、脂質/RNA等多個維度來評估外泌體純度，避免mian單一方法的局限性。備注：脂質濃度用維思克思WSR0028-2測量；RNA濃度用維思克思WSR0039測量。三、評估外泌體的**性。如果用來做細胞或動物實驗，外泌體中含有影響細胞或動物的成分，實驗的結果將會令人非常詛喪。這次測評將外泌體的**性指標進行的評估，包括內外源病毒、細菌、支原體的檢測，結果顯示**性指標全部合格。

外泌體表征與定量難在什么地方？又該怎么做？我們拜訪過很多外泌體研究工作者，其中談到多的是外泌體難以分離，分離后的外泌體不好定量，定量的外泌體數據是否準確等問題。03如何表征考慮到外泌體中其他雜質對定量檢測的影響，建議先進行外泌體純度表征，確保外泌體純度在合理范圍內，再進行外泌體定量。外泌體純度表征可以用顆粒數/總蛋白、總蛋白/總脂質、顆粒數/總脂質、顆粒數/總核酸、總蛋白/總核酸等，從多個維度來評估外泌體純度。04如何定量外泌體發揮功能與其所載貨物相關，對外泌體定量可以考慮檢測外泌體中某些分子來評估。如某些蛋白標志、脂質、核酸、糖類等分子。針對外泌體表征與定量此類問題，維思克思不斷嘗試，經多次驗證終推出了外泌體表征與定量一系列產品。具體產品包括：BCA蛋白定量試劑盒、外泌體脂質定量試劑盒、外泌體核酸定量試劑盒、外泌體檢測抗體、外泌體RNAQC試劑盒、外泌體RNA定量試劑盒。外泌體研究工具標準化操作流程，新手也能快速上手，降低培訓成本。

外泌體RNA定量試劑盒外泌體的組成復雜，不僅包含脂質和蛋白質，RNA也是其組成部分。從目前文獻報道統計結果來看，RNA是外泌體發揮功能的主要物質。研究外泌體RNA組成和含量具有重要意義。從原理上來說，既然蛋白濃度可以一直作為外泌體定量和表征的重要指標。那么用RNA來對外泌體進行定量和表征也是非常可行的。外泌體中包含RNA分子，其在細胞通訊、疾病發展等方面具有重要的研究和應用價值。但目前外泌體缺乏有效的定量和表征方法，單一的檢測技術都有其局限性。WSR0039不需提取外泌體RNA，直接檢測微量RNA含量。具有操作簡便，靈敏度高，線性范圍廣，易于檢測等特點。該試劑盒的檢測線性范圍是0-25ng，比較低檢測限可至0.2ng。應用范圍：外泌體RNA定量、外泌體表征產品信息：ExosomalRNAQuantificationKit(Fluorometric)（WSR0039）。外泌體研究工具自動化數據分析兼容，適配主流軟件，提升分析效率。臍帶sEVs技術服務

外泌體研究工具小劑量包裝設計，適合少量多次實驗，減少試劑浪費。檸檬EVs細胞實驗

外泌體表征系列產品線目前外泌體缺乏有效的定量和表征方法，單一的檢測技術都有其局限性。維思克思全新系列產品—外泌體表征與定量試劑盒，該系列產品可對現有單一表征與定量方法進行補充，通過多維度對分離出的外泌體進行評估，使實驗數據更加科學、準確。01BCA蛋白定量試劑盒（WSR0022），具有靈敏度高、顯色速度快、線性范圍廣的優勢，可高效快速實現蛋白定量。02脂質定量試劑盒(WSR0028/WSR0028-2)，現有的脂質定量方法大都需要昂貴的儀器，本產品可代替大型儀器，實現小成本快速檢測，具有靈敏度高、操作簡便、線性范圍廣等優勢。03外泌體RNAQC試劑盒（WSR0013-1），經大量研究分析，篩選出2個陽性外泌體RNA靶標和1個陰性靶標，用于表征RNA質量。04外泌體蛋白標志物鑒定試劑盒（WSR0030），針對外泌體標志蛋白CD9、CD81、TSG101、Calnexin檢測而研發的一款方便高效的試劑盒產品，可監測實驗體系并準確檢測到外泌體中的以上蛋白。05外泌體RNA定量試劑盒（WSR0039），檢測線性范圍是0-25ng，比較低檢測限可至0.2ng，靈敏度高。檸檬EVs細胞實驗

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